Views: 0 Author: Site Editor ເວລາເຜີຍແຜ່: 2025-12-03 ຕົ້ນກໍາເນີດ: ເວັບໄຊ
ໃນຍຸກທີ່ຄອບງໍາໂດຍການວິນິດໄສໂມເລກຸນຢ່າງໄວວາແລະເຕັກໂນໂລຢີ PCR, ແບບດັ້ງເດີມ ວັດທະນະທໍາຊີວະພາບ ຍັງຄົງເປັນ 'ມາດຕະຖານຄໍາ' ທີ່ບໍ່ມີການໂຕ້ຖຽງສໍາລັບການກໍານົດເຊື້ອພະຍາດທີ່ແນ່ນອນແລະການທົດສອບຄວາມອ່ອນໄຫວຕໍ່ກັບຢາຕ້ານເຊື້ອ. ໃນຂະນະທີ່ວິທີການໂມເລກຸນສາມາດກວດພົບຊິ້ນ DNA ໄດ້ໄວ, ພວກມັນບໍ່ສາມາດແຍກແຍະລະຫວ່າງສິ່ງມີຊີວິດແລະສິ່ງທີ່ຕາຍແລ້ວ, ແລະພວກເຂົາບໍ່ສາມາດຄາດເດົາໄດ້ຢ່າງເຕັມສ່ວນຮູບແບບການຕໍ່ຕ້ານ phenotypic. ຂໍ້ຈໍາກັດນີ້ເຮັດໃຫ້ເຕັກນິກວັດທະນະທໍາເປັນສິ່ງທີ່ຂາດບໍ່ໄດ້ສໍາລັບແພດຫມໍທີ່ຕ້ອງການຂໍ້ມູນການປະຕິບັດເພື່ອກໍານົດການປິ່ນປົວທີ່ຊັດເຈນ.
ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ຄວາມຫນ້າເຊື່ອຖືຂອງຜົນໄດ້ຮັບເຫຼົ່ານີ້ hangs ໂດຍ thread. ເຕັກນິກວັດທະນະທໍາທີ່ບໍ່ຖືກຕ້ອງ, ການເຫນັງຕີງຂອງສິ່ງແວດລ້ອມ, ຫຼືການນໍາໃຊ້ອຸປະກອນການບໍລິໂພກທີ່ມີຄຸນນະພາບຕ່ໍາມັກຈະເຮັດໃຫ້ເກີດການປົນເປື້ອນຕົວຢ່າງ, ຜົນກະທົບທີ່ບໍ່ດີ, ແລະຄວາມຊັກຊ້າທີ່ເປັນອັນຕະລາຍໃນການດູແລຄົນເຈັບ. ມັນເປັນສະພາບແວດລ້ອມທີ່ມີສະເຕກສູງທີ່ຄວາມຜິດພາດດຽວໃນລະບົບຕ່ອງໂສ້ aseptic ສາມາດປະນີປະນອມການວິນິດໄສທັງຫມົດ.
ພວກເຮົາຕ້ອງກໍານົດຂະບວນການນີ້ບໍ່ພຽງແຕ່ເປັນ 'ການຂະຫຍາຍຕົວຂອງເຊື້ອແບັກທີເຣັຍ,' ແຕ່ເປັນຂະບວນການເຮັດວຽກທີ່ເຂັ້ມງວດ, ຄວບຄຸມ. ຄວາມສໍາເລັດຮຽກຮ້ອງໃຫ້ມີການຍຶດຫມັ້ນຢ່າງເຂັ້ມງວດໃນຂັ້ນຕອນການປະຕິບັດມາດຕະຖານ (SOPs), ອຸປະກອນຊັ້ນສູງ, ແລະການຄຸ້ມຄອງສິ່ງແວດລ້ອມທີ່ຊັດເຈນ. ໂດຍການເຂົ້າໃຈຈຸດຕັດກັນທີ່ສໍາຄັນຂອງເຕັກນິກແລະເຄື່ອງມື, ຫ້ອງທົດລອງສາມາດຮັບປະກັນຜົນໄດ້ຮັບທີ່ສາມາດແຜ່ພັນໄດ້ທີ່ປົກປ້ອງສຸຂະພາບຂອງຄົນເຈັບແລະເພີ່ມປະສິດທິພາບການປະຕິບັດງານ.
ຄວາມຈໍາເປັນໃນການວິນິດໄສ: ເປັນຫຍັງວັດທະນະທໍາຍັງດີກວ່າການທົດສອບຢ່າງໄວວາເພື່ອກໍານົດຄວາມຕ້ານທານຂອງຢາຕ້ານເຊື້ອ (antibiograms).
ROI ອຸປະກອນ: ຄຸນນະພາບຂອງ Petri , ທໍ່ວັດທະນະທໍາ , ແລະ inoculation loops ກ່ຽວຂ້ອງໂດຍກົງກັບອັດຕາການປົນເປື້ອນແລະຄ່າໃຊ້ຈ່າຍແຮງງານ.
ການຄຸ້ມຄອງຄວາມສ່ຽງ: ໂປໂຕຄອນສຳຄັນເພື່ອປ້ອງກັນການປົນເປື້ອນຂ້າມ ແລະ ກໍານົດບັນຫາ 'ໄລຍະລາກ'.
ເງື່ອນໄຂການປະເມີນຜົນ: ສິ່ງທີ່ຄວນຊອກຫາໃນເວລາທີ່ເລືອກສື່ວັດທະນະທໍາແລະອຸປະກອນທາງດ້ານຮ່າງກາຍສໍາລັບຫ້ອງທົດລອງທີ່ມີຄວາມໄວສູງ.
ເພື່ອຮູ້ຈັກຄຸນຄ່າຂອງວິທີການວັດທະນະທໍາ, ພວກເຮົາຕ້ອງເບິ່ງເກີນກວ່າຄໍານິຍາມຂອງປື້ມຕໍາລາ. ຢູ່ໃນຫຼັກຂອງມັນ, ວັດທະນະທໍາຊີວະພາບແມ່ນ ການຈໍາລອງຂອງຈຸລັງ ທີ່ຄວບຄຸມ - ບໍ່ວ່າຈະເປັນເຊື້ອແບັກທີເຣັຍ, ເຊື້ອລາ, ຫຼືເນື້ອເຍື່ອ - ພາຍໃນສະພາບແວດລ້ອມປອມ. ຄວາມແຕກຕ່າງທີ່ ສຳ ຄັນແມ່ນຢູ່ໃນການຄວບຄຸມ. ເງື່ອນໄຂ ໃນ vivo (ພາຍໃນຮ່າງກາຍ) ມີຄວາມຊັບຊ້ອນແລະປ່ຽນແປງໄດ້, ໃນຂະນະທີ່ ເງື່ອນໄຂ ໃນ vitro (ໃນແກ້ວຫຼືພາດສະຕິກ) ອະນຸຍາດໃຫ້ນັກວິຊາການສາມາດແຍກຕົວແປສະເພາະເພື່ອສັງເກດເບິ່ງວິທີການຂອງອົງການຈັດຕັ້ງ.
ວັດທະນະທໍາບໍ່ໄດ້ຖືວ່າປະສົບຜົນສໍາເລັດພຽງແຕ່ເນື່ອງຈາກວ່າບາງສິ່ງບາງຢ່າງຈະເລີນເຕີບໂຕ. ມັນຕ້ອງຕອບສະຫນອງຈຸດປະສົງທາງດ້ານຄລີນິກສະເພາະເພື່ອເປັນປະໂຫຍດສໍາລັບການວິນິດໄສ:
ການລະບຸຕົວຕົນ: ຂະບວນການຕ້ອງຢືນຢັນຕົວຕົນສະເພາະຂອງເຊື້ອພະຍາດ. ຕົວຢ່າງ, ການຈໍາແນກລະຫວ່າງ Staphylococcus aureus ແລະ Streptococcus pyogenes ຮຽກຮ້ອງໃຫ້ມີຮູບແບບການຂະຫຍາຍຕົວທີ່ແຕກຕ່າງກັນແລະປະຕິກິລິຍາທາງຊີວະເຄມີ.
ປະລິມານ: ໃນຫຼາຍໆສະຖານະການ, ເຊັ່ນການຕິດເຊື້ອທາງເດີນປັດສະວະ, ການປະກົດຕົວຂອງເຊື້ອແບັກທີເຣັຍແມ່ນບໍ່ພຽງພໍ; ພວກເຮົາຈໍາເປັນຕ້ອງຮູ້ວ່າການນັບອານານິຄົມ. ການກໍານົດການໂຫຼດໄວຣັສຫຼືຄວາມຫນາແຫນ້ນຂອງແບັກທີເລຍຊ່ວຍໃຫ້ແພດປະເມີນຄວາມຮ້າຍແຮງຂອງການຕິດເຊື້ອ.
ຄວາມອ່ອນໄຫວແລະຄວາມສະເພາະ: ໃນຂະນະທີ່ການທົດສອບ antigen ແມ່ນໄວ, ພວກມັນມັກຈະຂາດຄວາມອ່ອນໄຫວ. ວັດ ທະ ນະ ທໍາ ສະ ຫນອງ ການ ສະ ເພາະ ທີ່ ສູງ ຂຶ້ນ, ການ ຮັບ ປະ ກັນ ວ່າ ການ ປິ່ນ ປົວ ເປົ້າ ຫມາຍ ເຊື້ອ ພະ ຍາດ ຕົວ ຈິງ ແທນ ທີ່ ຈະ ເປັນ ປອມ reactive ຂ້າມ.
ປະໂຫຍດຂອງລະບົບວັດທະນະ ທຳ ຂະຫຍາຍອອກໄປນອກໂຮງ ໝໍ. ພວກເຮົາຈັດປະເພດການແກ້ໄຂເຫຼົ່ານີ້ອອກເປັນສາມຂົງເຂດຍຸດທະສາດຕົ້ນຕໍ:
ວັດທະນະທໍາການວິນິດໄສ: ເຫຼົ່ານີ້ແມ່ນສໍາຄັນສໍາລັບການດູແລຄົນເຈັບທັນທີທັນໃດ. ເລືອດ, ປັດສະວະ, ແລະວັດທະນະທໍາຂອງບາດແຜຈະກໍານົດວ່າຄົນເຈັບໄດ້ຮັບຢາຕ້ານເຊື້ອຢ່າງກວ້າງຂວາງຫຼືການປິ່ນປົວດ້ວຍເປົ້າຫມາຍ.
ວັດທະນະທໍາການຄົ້ນຄວ້າ: ຫ້ອງທົດລອງໃຊ້ສາຍເຊນທີ່ຖືກສ້າງຕັ້ງຂື້ນ, ເຊັ່ນ HeLa, ສໍາລັບການກວດສອບຢາແລະການຄົ້ນຄວ້າມະເຮັງ. ຄວາມສອດຄ່ອງຢູ່ທີ່ນີ້ແມ່ນສໍາຄັນ; ເສັ້ນຈຸລັງທີ່ປົນເປື້ອນສາມາດເຮັດໃຫ້ຂໍ້ມູນການຄົ້ນຄວ້າຫຼາຍປີບໍ່ຖືກຕ້ອງ.
ການນຳໃຊ້ຢາ: ການຜະລິດວັກຊີນ ແລະ ການທົດສອບການເປັນໝັນແມ່ນອີງໃສ່ລະບົບວັດທະນະທຳຂະໜາດໃຫຍ່ເພື່ອຮັບປະກັນວ່າຜະລິດຕະພັນມີຄວາມປອດໄພສຳລັບການນຳໃຊ້ຂອງມະນຸດ.
ເຄື່ອງມືທາງດ້ານຮ່າງກາຍທີ່ໃຊ້ໃນຫ້ອງທົດລອງບໍ່ພຽງແຕ່ເປັນສິນຄ້າ; ພວກມັນເປັນອຸປະສັກຕົ້ນຕໍລະຫວ່າງຕົວຢ່າງທີ່ບໍລິສຸດແລະການປົນເປື້ອນ. ເມື່ອປະເມີນຄ່າໃຊ້ຈ່າຍທັງຫມົດຂອງຄວາມເປັນເຈົ້າຂອງ (TCO), ຜູ້ຈັດການຫ້ອງທົດລອງຕ້ອງພິຈາລະນາວ່າຄ່າໃຊ້ຈ່າຍຂອງການທົດສອບທີ່ລົ້ມເຫລວ - ແຮງງານ, reagents, ແລະການຊັກຊ້າທາງດ້ານການຊ່ວຍ - ໄກກວ່າການປະຫຍັດຈາກລາຄາຖືກກວ່າ, ຄຸນນະພາບຕ່ໍາ.
ການເລືອກເຮືອທີ່ຖືກຕ້ອງແມ່ນບາດກ້າວທໍາອິດໃນການໂດດດ່ຽວສົບຜົນສໍາເລັດ. ມາດຕະຖານ Petri Dish ແມ່ນມ້າເຮັດວຽກສໍາລັບການໂດດດ່ຽວ streaking. ມັນສະຫນອງພື້ນທີ່ກວ້າງສໍາລັບການແຍກອານານິຄົມສ່ວນບຸກຄົນ. ຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ທ່ານຕ້ອງປະເມີນຄວາມຊັດເຈນ optical ຂອງພາດສະຕິກ. polystyrene ທີ່ມີຄຸນນະພາບສູງຮັບປະກັນວ່າການກວດສອບກ້ອງຈຸລະທັດສາມາດເກີດຂື້ນໄດ້ໂດຍບໍ່ຕ້ອງເປີດຝາ, ຫຼຸດຜ່ອນຄວາມສ່ຽງຕໍ່ການປົນເປື້ອນ.
ສໍາລັບການກວດກາທີ່ມີລະດັບສູງ, ຫຼາຍດີ ແຜ່ນວັດທະນະທໍາ ແມ່ນດີກວ່າ. ແຜ່ນເຫຼົ່ານີ້ອະນຸຍາດໃຫ້ມີການທົດສອບພ້ອມໆກັນຂອງຕົວຢ່າງຫຼາຍຫຼືເງື່ອນໄຂ, ເພີ່ມຂຶ້ນຢ່າງຫຼວງຫຼາຍໂດຍຜ່ານຫ້ອງທົດລອງ. ເມື່ອເລືອກແຜ່ນ, ໃຫ້ກວດເບິ່ງກົນໄກການລະບາຍອາກາດຂອງຝາປິດທີ່ອະນຸຍາດໃຫ້ແລກປ່ຽນອາຍແກັສໄດ້ພຽງພໍໂດຍບໍ່ໃຫ້ມີສ່ວນປະສົມໃນອາກາດ.
ໃນເວລາທີ່ຈັດການກັບການເກັບຮັກສາໃນໄລຍະຍາວຫຼືວັດທະນະທໍາ broth, ໄດ້ ທໍ່ວັດທະນະທໍາ ກາຍເປັນເຄື່ອງມືທາງເລືອກ. ທໍ່ແມ່ນເຫມາະສົມສໍາລັບການສ້າງ 'slants'—agar ແຂງຢູ່ມຸມຫນຶ່ງເພື່ອຂະຫຍາຍພື້ນທີ່ສູງສຸດໃນຮອຍຕີນຂະຫນາດນ້ອຍ. ຈຸດການຕັດສິນໃຈທີ່ສໍາຄັນຢູ່ທີ່ນີ້ແມ່ນຮູບແບບຫມວກ. Screw caps ສະຫນອງການປະທັບຕາທີ່ແຫນ້ນຫນາສໍາລັບການເກັບຮັກສາເພື່ອປ້ອງກັນການຂາດນ້ໍາ, ໃນຂະນະທີ່ຫມວກກັນກະທົບຫຼືຫມວກລະບາຍອາກາດຊ່ວຍໃຫ້ການລະບາຍອາກາດທີ່ຈໍາເປັນສໍາລັບວັດທະນະທໍາແອໂຣບິກທີ່ເຕີບໂຕຢ່າງໄວວາ.
ເມື່ອສະພາບແວດລ້ອມໄດ້ຖືກເລືອກ, ຈຸດສຸມຈະປ່ຽນໄປສູ່ວິທີການຍ້າຍຕົວຢ່າງ. ໄດ້ Inoculation loop ແມ່ນເຄື່ອງມືມາດຕະຖານສໍາລັບການໂອນແລະ streaking ສິ່ງມີຊີວິດ. ຫ້ອງທົດລອງມັກຈະໂຕ້ວາທີລະຫວ່າງທາງເລືອກທີ່ໃຊ້ຄືນໄດ້ແລະຖິ້ມໄດ້:
| ຄຸນນະສົມບັດ | Loop ທີ່ໃຊ້ຄືນໃຫມ່ໄດ້ (Nichrome / Platinum) | Disposable Loop (ພາດສະຕິກ) |
|---|---|---|
| ໂຄງສ້າງຄ່າໃຊ້ຈ່າຍ | ການລົງທຶນເບື້ອງຕົ້ນສູງ, ຄ່າໃຊ້ຈ່າຍຕໍ່ເນື່ອງຕໍ່າ. | ຄ່າໃຊ້ຈ່າຍຕໍ່ເນື່ອງທີ່ສູງຂຶ້ນ, ການລົງທຶນເບື້ອງຕົ້ນຕໍ່າ. |
| ເປັນໝັນ | ຮຽກຮ້ອງໃຫ້ມີການຂ້າເຊື້ອໄຟລະຫວ່າງການນໍາໃຊ້. | ຮັບປະກັນການຂ້າເຊື້ອ (gamma irradiated). |
| ຄວາມສ່ຽງດ້ານຄວາມປອດໄພ | ຄວາມສ່ຽງຂອງ aerosolizing ເຊື້ອພະຍາດໃນລະຫວ່າງການ flaming (splatter). | ບໍ່ມີຄວາມສ່ຽງ aerosolization; ຄວາມປອດໄພໃນການນໍາໃຊ້ຄັ້ງດຽວ. |
| ຂະບວນການເຮັດວຽກ | ຊ້າລົງ (ລໍຖ້າໃຫ້ເຢັນ). | ໄວກວ່າ (ພ້ອມໃຊ້ທັນທີ). |
ສໍາລັບຄໍາຮ້ອງສະຫມັກທີ່ຮຽກຮ້ອງໃຫ້ມີການຂະຫຍາຍຕົວຂອງ 'ສະຫນາມຫຍ້າ' ເປັນເອກະພາບ, ເຊັ່ນ: ການທົດສອບຄວາມອ່ອນໄຫວຂອງຢາຕ້ານເຊື້ອ, ວົງຈອນບໍ່ມີປະສິດທິພາບ. ແທນທີ່ຈະ, ນັກວິຊາການໃຊ້ a Cell Spreader . ມີຢູ່ໃນຮູບຊົງ 'L' ຫຼື 'T', ເຄື່ອງມືເຫຼົ່ານີ້ຮັບປະກັນເຖິງແມ່ນວ່າການແຜ່ກະຈາຍຂອງ inoculum ຂອງແຫຼວໃນທົ່ວພື້ນຜິວ agar. ການເລືອກລະຫວ່າງແກ້ວ (ໃຊ້ຄືນໄດ້) ແລະພາດສະຕິກ (ຖິ້ມແລ້ວ) ມັກຈະສະທ້ອນເຖິງເຫດຜົນທີ່ໃຊ້ສໍາລັບ loops, ດ້ວຍເຄື່ອງແຜ່ພາດສະຕິກໄດ້ຮັບຄວາມນິຍົມສໍາລັບຄວາມລຽບຂອງມັນ, ເຊິ່ງປ້ອງກັນການຈີກຂາດຂອງພື້ນຜິວ agar.
ສຸດທ້າຍ, ການຈັດການແຜ່ນຢາຕ້ານເຊື້ອທີ່ຊັດເຈນ ຫຼືຕົວຢ່າງເນື້ອເຍື່ອທີ່ເປັນໝັນຮຽກຮ້ອງໃຫ້ມີການຊ່ຽວຊານ ບິດ . ບໍ່ເຫມືອນກັບ forceps ມາດຕະຖານ, tweezers ຫ້ອງທົດລອງເປັນຫມັນໄດ້ຖືກອອກແບບເພື່ອຈັດການລາຍການທີ່ລະອຽດອ່ອນໂດຍບໍ່ມີການນໍາສະເຫນີສານເຄມີຕົກຄ້າງຫຼືສານປົນເປື້ອນທາງຊີວະພາບ.
ເຈົ້າຫນ້າທີ່ຈັດຊື້ມັກຈະເບິ່ງຂ້າມຄ່າໃຊ້ຈ່າຍທີ່ເຊື່ອງໄວ້. ເຄື່ອງບໍລິໂພກລາຄາຖືກອາດມີພື້ນຜິວພາດສະຕິກທີ່ບໍ່ລຽບ. ຄວາມຫຍາບຂອງກ້ອງຈຸລະທັດນີ້ສາມາດສົ່ງຜົນກະທົບຕໍ່ການຍຶດຕິດຂອງເຊນໃນເນື້ອເຍື່ອ ຫຼືເຮັດໃຫ້ເກີດການຈະເລີນເຕີບໂຕຂອງເຊື້ອແບັກທີເຣັຍທີ່ບໍ່ສະຫມໍ່າສະເຫມີ. ຖ້າ ຝາປິດ ຖ້ວຍ Petri ບໍ່ເຫມາະຢ່າງສົມບູນ, ສື່ຈະຂາດນ້ໍາໄວ, ເຮັດໃຫ້ການທົດສອບບໍ່ຖືກຕ້ອງ. ການລົງທຶນໃນເຄື່ອງປຼາສະຕິກທີ່ມີຄວາມແມ່ນຍໍາສູງຫຼຸດຜ່ອນຄວາມສ່ຽງເຫຼົ່ານີ້.
ເຖິງແມ່ນວ່າເຄື່ອງມືທີ່ດີທີ່ສຸດກໍ່ບໍ່ສາມາດບັງຄັບໃຫ້ອົງການຈັດຕັ້ງຂະຫຍາຍຕົວໄດ້ຖ້າຫາກວ່າສະພາບໂພຊະນາການແລະສິ່ງແວດລ້ອມບໍ່ດີ. ການເລືອກສື່ທີ່ຖືກຕ້ອງແມ່ນເປັນກອບການຕັດສິນໃຈໂດຍອີງໃສ່ຄໍາຖາມທາງດ້ານການຊ່ວຍ.
ທາງເລືອກທໍາອິດແມ່ນລັດທາງດ້ານຮ່າງກາຍ: ແຂງທຽບກັບຂອງແຫຼວ. ສື່ແຂງ (Agar) ເປັນສິ່ງຈໍາເປັນໃນເວລາທີ່ທ່ານຕ້ອງການແຍກອານານິຄົມບໍລິສຸດອອກຈາກຕົວຢ່າງປະສົມ. ສື່ຂອງແຫຼວ (Broth) ຖືກນໍາໃຊ້ໃນເວລາທີ່ເປົ້າຫມາຍແມ່ນການສະສົມຊີວະມວນຢ່າງໄວວາຫຼືຟື້ນຟູສາຍພັນ lyophilized.
ນອກເໜືອໄປຈາກລັດ, ພວກເຮົາແຍກແຍະຕາມໜ້າທີ່:
ສື່ທີ່ເລືອກ: ມີສານຍັບຍັ້ງເພື່ອຢຸດການຈະເລີນເຕີບໂຕຂອງຈຸລິນຊີທີ່ບໍ່ຕ້ອງການ. ຕົວຢ່າງ, MacConkey agar inhibits ເຊື້ອແບັກທີເຣັຍ Gram-positive, ໃຫ້ນັກວິຊາການສຸມໃສ່ພຽງແຕ່ສິ່ງທີ່ມີຊີວິດ Gram-negative ມັກຈະພົບເຫັນຢູ່ໃນຕົວຢ່າງຂອງລໍາໄສ້.
ສື່ທີ່ແຕກຕ່າງ: ມີຕົວຊີ້ບອກ (ໂດຍປົກກະຕິແລ້ວການຍ້ອມສີ) ທີ່ປ່ຽນສີໂດຍອີງໃສ່ປະຕິກິລິຍາທາງຊີວະເຄມີ. ນີ້ອະນຸຍາດໃຫ້ມີຄວາມແຕກຕ່າງທາງສາຍຕາລະຫວ່າງຊະນິດທີ່ຢູ່ໃນແຜ່ນດຽວກັນ, ເຊັ່ນ: ເຄື່ອງຫມັກທຽບກັບເຄື່ອງຫມັກ.
ຈຸລິນຊີມີຄວາມອ່ອນໄຫວຕໍ່ກັບບັນຍາກາດຂອງມັນ. aerobes ທີ່ເຄັ່ງຄັດຕ້ອງການອົກຊີເຈນ, ໃນຂະນະທີ່ anaerobes ຕາຍຢູ່ໃນທີ່ປະທັບຂອງມັນ. Microaerophiles ຕ້ອງການລະດັບອົກຊີເຈນທີ່ຫຼຸດລົງ. ການຮັກສາອັດຕາສ່ວນເຫຼົ່ານີ້ຢູ່ໃນຫ້ອງອົບຮຽກຮ້ອງໃຫ້ມີລະບຽບການອາຍແກັສທີ່ຊັດເຈນ. ອຸນຫະພູມແມ່ນສໍາຄັນເທົ່າທຽມກັນ; ໃນຂະນະທີ່ເຊື້ອພະຍາດຂອງມະນຸດສ່ວນຫຼາຍແມ່ນ mesophiles (ຂະຫຍາຍຕົວດີທີ່ສຸດໃນອຸນຫະພູມຮ່າງກາຍ, 37 ° C), ຕົວຢ່າງຂອງສິ່ງແວດລ້ອມມັກຈະມີ psychrophiles ທີ່ມັກອຸນຫະພູມທີ່ເຢັນກວ່າ.
ຂຸມທີ່ພົບເລື້ອຍແມ່ນຈັ່ນຈັບ 'Lag Phase'. ເມື່ອສາຍພັນຖືກຟື້ນຟູຈາກຫຼັກຊັບແຊ່ແຂງຫຼືສື່ການຂົນສົ່ງ, ພວກມັນບໍ່ໄດ້ແບ່ງອອກທັນທີ. ພວກເຂົາເຂົ້າສູ່ໄລຍະ lag ເພື່ອສ້ອມແປງເຄື່ອງຈັກໂທລະສັບມືຖື. ຖ້ານັກວິຊາການຫ້ອງທົດລອງກວດເບິ່ງການເຕີບໂຕໄວເກີນໄປ, ພວກເຂົາອາດຈະລາຍງານຜົນລົບທີ່ບໍ່ຖືກຕ້ອງ. ການເຂົ້າໃຈຄວາມເປັນຈິງທາງຊີວະພາບນີ້ປ້ອງກັນການທໍາລາຍວັດທະນະທໍາກ່ອນໄວອັນຄວນ.
ການປົນເປື້ອນແມ່ນ nemesis ຂອງຫ້ອງທົດລອງວັດທະນະທໍາ. ມັນທໍາລາຍຕົວຢ່າງ, ສູນເສຍສື່ລາຄາແພງ, ແລະທໍາລາຍຄວາມສົມບູນຂອງຂໍ້ມູນ. ໂດຍທົ່ວໄປພວກເຮົາຈັດປະເພດການປົນເປື້ອນອອກເປັນສາມເສົາຄ້ຳ:
ຊີວະວິທະຍາ: ນີ້ປະກອບມີເຊື້ອແບັກທີເຣັຍທີ່ບໍ່ຕ້ອງການ, ເຊື້ອລາ, ແລະ mycoplasma. Mycoplasma ແມ່ນ insidious ໂດຍສະເພາະໃນສາຍເຊນເນື່ອງຈາກວ່າມັນເບິ່ງບໍ່ເຫັນພາຍໃຕ້ກ້ອງຈຸລະທັດມາດຕະຖານແລະບໍ່ໄດ້ເຮັດໃຫ້ສື່ມວນຊົນມີເມຄ, ແຕ່ມັນປ່ຽນແປງການເຜົາຜະຫລານຂອງຈຸລັງຢ່າງຫຼວງຫຼາຍ.
ເຄມີ: ສານຕົກຄ້າງຈາກສານຊັກຟອກໃນເຄື່ອງແກ້ວທີ່ໃຊ້ຄືນໄດ້ ຫຼື endotoxins ໃນການສະຫນອງນ້ໍາສາມາດຍັບຍັ້ງການຂະຫຍາຍຕົວຫຼືຂ້າຈຸລັງທີ່ລະອຽດອ່ອນ.
ການປົນເປື້ອນຂ້າມ: ນີ້ເກີດຂຶ້ນເມື່ອຕົວຢ່າງຫນຶ່ງຕິດເຊື້ອອີກ. ກໍລະນີທີ່ມີຊື່ສຽງຂອງຈຸລັງ HeLa overgrowing ຈຸລັງອື່ນໆເຮັດຫນ້າທີ່ເປັນການເຕືອນໄພສໍາລັບຫ້ອງທົດລອງ.
ເຕັກນິກ aseptic ແມ່ນການປ້ອງກັນຕົ້ນຕໍ. ການປະຕິບັດງານຄວນເກີດຂຶ້ນພາຍໃນທໍ່ລະບາຍອາກາດ laminar ຫຼືຕູ້ຄວາມປອດໄພດ້ານຊີວະພາບເພື່ອຮັກສາຜ້າມ່ານອາກາດທີ່ບໍ່ສະອາດ. ນັກວິຊາການຕ້ອງໄດ້ຮັບການຝຶກອົບຮົມກ່ຽວກັບການຈັດການທີ່ເຫມາະສົມຂອງ loop inoculation ແລະ cell spreader . ເຂົາເຈົ້າຕ້ອງບໍ່ເຄີຍຜ່ານແຂນ ຫຼືອຸປະກອນທີ່ບໍ່ເປັນໝັນຜ່ານສື່ເປີດ. ລະບົບຕ່ອງໂສ້ຂອງການຕິດເຊື້ອແມ່ນແຕກແຍກພຽງແຕ່ໂດຍການຍຶດຫມັ້ນຢ່າງເຂັ້ມງວດຕໍ່ໂປໂຕຄອນທາງກວ້າງຂອງພື້ນທີ່ເຫຼົ່ານີ້.
QC ປົກກະຕິແມ່ນບໍ່ສາມາດຕໍ່ລອງໄດ້. ຫ້ອງທົດລອງຄວນດໍາເນີນການ 'blank' ເລື້ອຍໆ - incubating media ໂດຍບໍ່ມີການ inoculation - ເພື່ອກວດສອບການເປັນຫມັນ. ຖ້າຫາກວ່າການຂະຫຍາຍຕົວປາກົດຢູ່ໃນແຜ່ນເປົ່າ, batch ຂອງສື່ມວນຊົນທັງຫມົດແມ່ນສົງໃສ. ນອກຈາກນັ້ນ, ການນໍາໃຊ້ສາຍພັນອ້າງອີງ (ເຊັ່ນ: ຈາກ ATCC) ຮັບປະກັນວ່າສື່ມວນຊົນສະຫນັບສະຫນູນການຂະຫຍາຍຕົວຕາມທີ່ຄາດໄວ້. ຖ້າສາຍພັນອ້າງອີງບໍ່ຂະຫຍາຍຕົວ, ຕົວຢ່າງຂອງຄົນເຈັບອາດຈະໃຫ້ຜົນລົບທີ່ບໍ່ຖືກຕ້ອງ.
ໃນສະຖານທີ່ທາງດ້ານຄລີນິກ, ຄວາມໄວມັກຈະເທົ່າກັບຄຸນນະພາບ. ແນວໃດກໍ່ຕາມ, ວັດທະນະທໍາຊີວະພາບບັງຄັບໃຊ້ 'ໂມງຊີວະພາບ' ທີ່ບໍ່ສາມາດເລັ່ງໄດ້ໂດຍບໍ່ມີຄວາມສ່ຽງ.
ພາກສ່ວນກ່ຽວຂ້ອງຕ້ອງຄຸ້ມຄອງຄວາມຄາດຫວັງກ່ຽວກັບໄລຍະເວລາ. ຂັ້ນຕອນການເຮັດວຽກປົກກະຕິກ່ຽວຂ້ອງກັບການຟອກ (24-48 ຊົ່ວໂມງ) ເພື່ອເບິ່ງອານານິຄົມ, ຕິດຕາມມາດ້ວຍການລະບຸຕົວຕົນ (ອີກ 24 ຊົ່ວໂມງ), ແລະສຸດທ້າຍແມ່ນການທົດສອບຄວາມອ່ອນໄຫວຂອງຢາຕ້ານເຊື້ອ (24 ຊົ່ວໂມງ). ໄລຍະເວລາ 3-5 ມື້ນີ້ແມ່ນຄວາມຈິງທາງຊີວະພາບ. ການສື່ສານນີ້ກັບແພດຊ່ວຍຈັດການຄວາມກົດດັນສໍາລັບຜົນໄດ້ຮັບ 'ທັນທີ'.
ຫ້ອງທົດລອງປະລິມານສູງປະເຊີນກັບທາງເລືອກລະຫວ່າງຄວາມຍືດຫຍຸ່ນແລະການສົ່ງຜ່ານ:
ຂະບວນການເຮັດວຽກດ້ວຍມື: ສະເຫນີຄວາມຍືດຫຍຸ່ນສູງ. ນັກວິຊາການສາມາດປັບຕົວໄດ້ໄວກັບປະເພດຕົວຢ່າງທີ່ຜິດປົກກະຕິ. ຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ມັນຮຽກຮ້ອງໃຫ້ມີລະດັບທັກສະທີ່ສູງຂຶ້ນແລະມີຄວາມສ່ຽງຕໍ່ການປ່ຽນແປງຂອງມະນຸດ.
ຂະບວນການເຮັດວຽກແບບອັດຕະໂນມັດ: ລະບົບເຊັ່ນ: ການກວດກາຢ່າງຕໍ່ເນື່ອງຂອງຂວດວັດທະນະທໍາເລືອດ ຫຼືຕົວເກັບແຜ່ນອັດຕະໂນມັດ ຫຼຸດຜ່ອນອັດຕາແຮງງານ ແລະຄວາມຜິດພາດ. ພວກເຂົາຕ້ອງການຄ່າໃຊ້ຈ່າຍທຶນສູງ (CAPEX) ແຕ່ສະເຫນີຄ່າໃຊ້ຈ່າຍໃນການດໍາເນີນງານຕ່ໍາ (OPEX) ໃນໄລຍະເວລາເນື່ອງຈາກການເພີ່ມປະສິດທິພາບ.
ເມື່ອຫ້ອງທົດລອງຂະຫຍາຍຕົວ, ການຈັດການ ດ້ວຍຕົນເອງ ຖ້ວຍ Petri ຈະກາຍເປັນຄໍຂວດ. ການຫັນປ່ຽນໄປສູ່ stackers ອັດຕະໂນມັດຫຼືການນໍາໃຊ້ 96 ດີ ແຜ່ນວັດທະນະທໍາ ເຮັດໃຫ້ຫ້ອງທົດລອງສາມາດປະມວນຜົນຫຼາຍຮ້ອຍຕົວຢ່າງພ້ອມໆກັນ. ຄວາມສາມາດໃນການຂະຫຍາຍນີ້ເປັນສິ່ງຈໍາເປັນສໍາລັບຫ້ອງທົດລອງອ້າງອິງຈັດການກັບຕົວຢ່າງພັນໆຄົນຕໍ່ມື້.
ວັດທະນະທໍາຊີວະພາບແມ່ນຫຼາຍກ່ວາພຽງແຕ່ເຕັກນິກການຂະຫຍາຍຕົວຂອງຈຸລິນຊີ; ມັນເປັນລະບົບການລະບຸທີ່ຊັບຊ້ອນທີ່ກໍານົດໂດຍກົງຜົນໄດ້ຮັບຂອງຄົນເຈັບແລະຄວາມຖືກຕ້ອງການຄົ້ນຄວ້າ. ຈາກການຄັດເລືອກເບື້ອງຕົ້ນຂອງ ແຜ່ນວັດທະນະທໍາ ເຖິງການຕີຄວາມຫມາຍສຸດທ້າຍຂອງການທົດສອບຄວາມອ່ອນໄຫວ, ທຸກໆຂັ້ນຕອນກໍານົດຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງຜົນໄດ້ຮັບ.
ການກວດສອບສຸດທ້າຍຂອງບົດລາຍງານການວິນິດໄສແມ່ນຂຶ້ນກັບຄວາມສົມບູນຂອງຂະບວນການ. ຜົນໄດ້ຮັບແມ່ນດີເທົ່າກັບຄຸນນະພາບຂອງຕົວຢ່າງ, ການປະຕິບັດຂອງສື່ວັດທະນະທໍາ, ແລະການເປັນຫມັນຂອງເຄື່ອງມືທີ່ໃຊ້. ຫ້ອງທົດລອງທີ່ຕັດມຸມຂອງເຄື່ອງບໍລິໂພກມັກຈະຈ່າຍລາຄາໃນການທົດສອບຄືນໃຫມ່, ການສືບສວນການປົນເປື້ອນ, ແລະຄວາມຫນ້າເຊື່ອຖືທີ່ສູນເສຍໄປ.
ພວກເຮົາຮຽກຮ້ອງໃຫ້ຜູ້ຈັດການຫ້ອງທົດລອງ ແລະ ພະນັກງານຈັດຊື້ຈັດລຽງລຳດັບຄວາມສຳຄັນຂອງເຄື່ອງອຸປະໂພກບໍລິໂພກທີ່ມີຄຸນນະພາບສູງ ແລະ ລົງທຶນໃນການຝຶກອົບຮົມຢ່າງເຂັ້ມງວດກ່ຽວກັບເຕັກນິກການປອດເຊື້ອ. ການຫຼຸດຜ່ອນຄ່າໃຊ້ຈ່າຍທັງຫມົດຂອງການເປັນເຈົ້າຂອງກ່ຽວຂ້ອງກັບການກໍາຈັດຄວາມຜິດພາດກ່ອນທີ່ມັນຈະເກີດຂຶ້ນ. ໂດຍການຮັບປະກັນວ່າຫ້ອງທົດລອງຂອງທ່ານມີເຄື່ອງມືທີ່ຊັດເຈນ - ຈາກ ເຄື່ອງບິດ ທີ່ຖ່ອມຕົວ ໄປຫາຕູ້ຄວາມປອດໄພດ້ານຊີວະພາບຂັ້ນສູງ - ທ່ານສ້າງພື້ນຖານຂອງຄວາມແມ່ນຍໍາໃນການວິນິດໄສທີ່ແພດຫມໍແລະຄົນເຈັບສາມາດໄວ້ວາງໃຈໄດ້.
A: ໃນຂະນະທີ່ PCR ໄວກວ່າ, ມັນພຽງແຕ່ກວດພົບການມີ DNA, ເຊິ່ງສາມາດມາຈາກເຊື້ອແບັກທີເຣັຍທີ່ມີຊີວິດຢູ່ແລະຕາຍ. ວັດທະນະທໍາຊີວະພາບຢືນຢັນ ຄວາມເປັນໄປໄດ້ ຂອງສິ່ງມີຊີວິດ - ພິສູດການຕິດເຊື້ອແທນທີ່ຈະເປັນພຽງແຕ່ການຕັ້ງຖິ່ນຖານຫຼືສິ່ງເສດເຫຼືອ. ນອກຈາກນັ້ນ, ວັດທະນະທໍາອະນຸຍາດໃຫ້ມີການທົດສອບຄວາມອ່ອນໄຫວຂອງຢາຕ້ານເຊື້ອ phenotypic, ສັງເກດເຫັນວ່າຢາໃດຂ້າເຊື້ອແບັກທີເຣັຍໃນເວລາທີ່ແທ້ຈິງ, ເຊິ່ງເປັນສິ່ງສໍາຄັນໃນການປິ່ນປົວການຕິດເຊື້ອທີ່ທົນທານຕໍ່ຢາຫຼາຍຊະນິດ.
A: ເປັນ ວົງ inoculation ຕົ້ນຕໍແມ່ນໃຊ້ສໍາລັບຕົວຢ່າງ streaking ເພື່ອແຍກອານານິຄົມສ່ວນບຸກຄົນ (ວິທີການ streak plate) ຫຼືການໂອນຈໍານວນຂະຫນາດນ້ອຍຂອງ inoculum. ຕົວ ກະຈາຍເຊລ (ຮູບຊົງຕົວ L ຫຼື T-shape) ແມ່ນໃຊ້ເພື່ອກະຈາຍຕົວຢ່າງຂອງແຫຼວໃຫ້ເທົ່າທຽມກັນທົ່ວພື້ນຜິວຂອງແຜ່ນ agar ເພື່ອສ້າງເປັນ 'ສະຫນາມຫຍ້າ' ຂອງການຈະເລີນເຕີບໂຕ. ສະຫນາມຫຍ້ານີ້ແມ່ນມີຄວາມຈໍາເປັນສໍາລັບການນັບອານານິຄົມຫຼືການທົດສອບການແຜ່ກະຈາຍຂອງແຜ່ນຢາຕ້ານເຊື້ອ.
A: ອາຍຸການເກັບຮັກສາແມ່ນຂຶ້ນກັບປະເພດສື່ແລະການຫຸ້ມຫໍ່. ໂດຍທົ່ວໄປແລ້ວ, ແຜ່ນທີ່ກຽມໄວ້ທາງການຄ້າສາມາດເກັບຮັກສາໄວ້ທີ່ 2-8 ອົງສາ C ເປັນເວລາຫຼາຍອາທິດ ຖ້າປິດຝາໄວ້ເພື່ອປ້ອງກັນການຂາດນໍ້າ. ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ຖ້າແຜ່ນແຫ້ງຫຼືຫົດຕົວອອກຈາກແຄມ, ພວກມັນຕ້ອງຖືກຍົກເລີກ. ເອົາແຜ່ນໃສ່ອຸນຫະພູມຫ້ອງກ່ອນທີ່ຈະນໍາໃຊ້ເພື່ອປ້ອງກັນການຂົ້ນຂອງຜົນກະທົບຕໍ່ວັດທະນະທໍາ.
A: 'No Growth' ບໍ່ໄດ້ໝາຍຄວາມວ່າບໍ່ມີການຕິດເຊື້ອສະເໝີໄປ. ສາເຫດທົ່ວໄປລວມມີຄົນເຈັບກິນຢາຕ້ານເຊື້ອກ່ອນການເກັບຕົວຢ່າງ (ການສະກັດກັ້ນການເຕີບໂຕ), ອົງການຈັດຕັ້ງ 'ໄວ' (ຕ້ອງການສານອາຫານພິເສດທີ່ບໍ່ມີຢູ່ໃນສື່ມາດຕະຖານ), ຫຼືສະພາບການຂົນສົ່ງທີ່ບໍ່ເຫມາະສົມ (ອຸນຫະພູມຫຼືເວລາຊັກຊ້າ) ເຮັດໃຫ້ເຊື້ອແບັກທີເຣັຍຕາຍກ່ອນທີ່ມັນຈະມາຮອດຫ້ອງທົດລອງ. ການຕິດເຊື້ອໄວຣັດຍັງຈະສົ່ງຜົນໃຫ້ບໍ່ມີການຂະຫຍາຍຕົວໃນສື່ແບັກທີເລຍມາດຕະຖານ.
